新疆农业科学 ›› 2024, Vol. 61 ›› Issue (12): 3089-3096.DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2024.12.024
唐丽1(), 李春艳2, 贾文浩1, 刘振亚1, 李亚鹏1, 但红侠1, 张王斌1(
)
收稿日期:
2024-05-28
出版日期:
2024-12-20
发布日期:
2025-01-16
通信作者:
张王斌(1974-),男,陕西澄城人,教授,硕士生导师,研究方向为植物病理学,(E-mail)zwbzky@163.com作者简介:
唐丽(1993-),女,四川德阳人,硕士研究生,研究方向为植物病理学,(E-mail)susuzaizai@163.com
基金资助:
TANG Li1(), LI Chunyan2, JIA Wenhao1, LIU Zhenya1, LI Yapeng1, DAN Hongxia1, ZHANG Wangbin1(
)
Received:
2024-05-28
Published:
2024-12-20
Online:
2025-01-16
Supported by:
摘要:
【目的】 鉴定在新疆奎屯市(44°26'35″N,84°54'24″E)和阿拉尔市(40°32'30″N,81°17'35″E)的山桃腐烂枝条病症。【方法】 从山桃腐烂枝条上分离出2株山桃腐烂病病原菌(KTST和TDST),测定分析田间症状、无性形态、致病性,并结合ITS、RPB2、Tef1-α多基因序列联合鉴定分析病原菌。【结果】 KTST和TDST的子座结构、孔口的数量、腔室形状及孢子类型均符合壳囊孢属(Cytospora)特征,KTST与TDST分离株与GenBank中已有的Cytospora leucostoma、Cytospora chrysosperma菌株聚为一个独立的分支。将腐烂病病原菌接种在离体的健康山桃枝上,引起腐烂病症状,验证其致病性。【结论】 新疆奎屯市和阿拉尔市的山桃腐烂病致病菌为Cytospora chrysosperma。
中图分类号:
唐丽, 李春艳, 贾文浩, 刘振亚, 李亚鹏, 但红侠, 张王斌. 新疆山桃腐烂病病原菌鉴定[J]. 新疆农业科学, 2024, 61(12): 3089-3096.
TANG Li, LI Chunyan, JIA Wenhao, LIU Zhenya, LI Yapeng, DAN Hongxia, ZHANG Wangbin. Identification of the pathogen of Prunus davidiana canker in Xinjiang[J]. Xinjiang Agricultural Sciences, 2024, 61(12): 3089-3096.
分离株 Strain | 寄主 Host plant | 寄主植物科 Host plant family | 寄主植物属 Host plant genus | 采集地点 Collection site | 地理位置 Geographic position | 海拔 Elevation(m) |
---|---|---|---|---|---|---|
KTST | 山桃 Prunus davidiana | 蔷薇科 Rosaceae Juss. | 桃属 Amygdalus L. | 新疆奎屯市 | 44°26'35″N,84°54'24″E | 470 |
TDST | 新疆阿拉尔市 | 40°32'30″N,81°17'35″E | 1 010 |
表1 供试材料
Tab.1 experimental material
分离株 Strain | 寄主 Host plant | 寄主植物科 Host plant family | 寄主植物属 Host plant genus | 采集地点 Collection site | 地理位置 Geographic position | 海拔 Elevation(m) |
---|---|---|---|---|---|---|
KTST | 山桃 Prunus davidiana | 蔷薇科 Rosaceae Juss. | 桃属 Amygdalus L. | 新疆奎屯市 | 44°26'35″N,84°54'24″E | 470 |
TDST | 新疆阿拉尔市 | 40°32'30″N,81°17'35″E | 1 010 |
基因名称 Gene | 引物名称 Primer | 引物序列 Primer sequence | 反应程序 Reaction program |
---|---|---|---|
核糖体基因 转录间隔区 ITS | ITS1 | 5’-CCGTAGGTGAACCTGCGG-3’ | 95℃预变性5 min,95℃变性1 min,48℃退火1 min,72℃延伸1 min,72℃延伸10 min,35个循环 |
ITS4 | 5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’ | ||
延伸因子 EF1-a | EF1-512F | 5’-ATGTGCAAGGCCGGTTTCGC-3’ | 95℃预变性5 min,95℃变性1.5 min,56℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,72℃延伸10 min,35个循环 |
EF1-783R | 5’-TACGAGTCCTTCTGGCCCAT-3’ | ||
RBP2 | RBP2-5F | 5’-GATCGATCACGATGATCATCTTTCGG-3’ | 95℃预变性5 min,95℃变性1.5 min,56℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,72℃延伸10 min,35个循环 |
RBP2-7Cr | 5’-CCCATAGGCTTGTCTTAGCCCAT-3’ |
表2 引物序列及反应程序
Tab.2 Primers sequence and reaction procedure
基因名称 Gene | 引物名称 Primer | 引物序列 Primer sequence | 反应程序 Reaction program |
---|---|---|---|
核糖体基因 转录间隔区 ITS | ITS1 | 5’-CCGTAGGTGAACCTGCGG-3’ | 95℃预变性5 min,95℃变性1 min,48℃退火1 min,72℃延伸1 min,72℃延伸10 min,35个循环 |
ITS4 | 5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’ | ||
延伸因子 EF1-a | EF1-512F | 5’-ATGTGCAAGGCCGGTTTCGC-3’ | 95℃预变性5 min,95℃变性1.5 min,56℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,72℃延伸10 min,35个循环 |
EF1-783R | 5’-TACGAGTCCTTCTGGCCCAT-3’ | ||
RBP2 | RBP2-5F | 5’-GATCGATCACGATGATCATCTTTCGG-3’ | 95℃预变性5 min,95℃变性1.5 min,56℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,72℃延伸10 min,35个循环 |
RBP2-7Cr | 5’-CCCATAGGCTTGTCTTAGCCCAT-3’ |
图1 KTST形态特征 注:A:田间发病症状;B,C:分生孢子器横切面;D:无性型子座;E,F:分生孢子器纵切面;G:分生孢子梗;H:分生孢子;I:菌落形态(3d和30d)。标尺:B,C,F=500 μm ;G-H=5 μm
Fig.1 Morphological characteristics of KTST Note:A: Symptoms of field disease; B, C: Transverse section of conidia; D: Asexual substratum; E, F: Longitudinal section of conidia; G: Conidiospore stalk; H: Conidium; I: Colony morphology (3 d and 30 d).Gauge: B,C,F=500 μm; G-H=5 μm
图2 TDST形态特征 注:A:田间发病症状;B,C:分生孢子器横切面;D:无性型子座;E:分生孢子器纵切面;G:分生孢子梗;H:分生孢子;F,I:菌落形态(3 d和30 d)。标尺:B-E=500μm;G-H=5μm
Fig.2 Morphological characteristics of TDST Notes:A: Symptoms of field disease; B, C: Transverse section of conidia; D: Asexual substratum; E: Longitudinal section of conidia; G: Conidiospore stalk; H: Conidium; F, I: Colony morphology (3 d and 30 d).Gauge: B,C,F=500 μm; G-H=5 μm
分离株 Strain | 发病率 Morbidity (%) | 显症时间 Disease time (h) | 病斑扩展速度 Rate of lesion expansion (cm/d) | 产孢时间 Sporulation time(d) | 分生孢子角颜色 Conidia color | 病斑颜色 Lesion color |
---|---|---|---|---|---|---|
KTST | 100 | 48 | 0.56 | 13 | 橘黄色 | 褐色 |
TDST | 100 | 48 | 0.79 | 15 | 橘黄色 | 褐色 |
CK | 0 | 0 | 0 | - | - | - |
表3 分离株KTST和TDST的致病性变化
Tab.3 Changes of KTST and TDST for pathogenicity determination
分离株 Strain | 发病率 Morbidity (%) | 显症时间 Disease time (h) | 病斑扩展速度 Rate of lesion expansion (cm/d) | 产孢时间 Sporulation time(d) | 分生孢子角颜色 Conidia color | 病斑颜色 Lesion color |
---|---|---|---|---|---|---|
KTST | 100 | 48 | 0.56 | 13 | 橘黄色 | 褐色 |
TDST | 100 | 48 | 0.79 | 15 | 橘黄色 | 褐色 |
CK | 0 | 0 | 0 | - | - | - |
图3 山桃枝条接种 注:A:KTST接种5 d;B:KTST接种14 d;C:TDST接种7 d
Fig.3 Inoculation of Prunus davidiana branches Notes:A: KTST vaccination for 5 days; B: 14 days after KTST inoculation; C: TDST was inoculated for 7 days
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