库尔勒香梨开花前后花药细菌多样性分析

doi:10.6048/j.issn.1001-4330.2024.08.018

新疆农业科学 ›› 2024, Vol. 61 ›› Issue (8): 1976-1982.DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2024.08.018

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库尔勒香梨开花前后花药细菌多样性分析

王庆朋(), 闫成才, 王喆, 苟长青, 王兰, 冯宏祖, 郝海婷()

塔里木大学农学院/南疆农业有害生物综合治理兵团重点实验室/农业部阿拉尔作物有害生物科学观测实验站,新疆阿拉尔 843300

收稿日期:2024-01-25 出版日期:2024-08-20 发布日期:2024-09-19
通信作者: 郝海婷(1986-),女,陕西人,副教授,博士,硕士生导师,研究方向为植物与微生物互作,(E-mail)Haohaiting213@taru.edu.cn
作者简介:王庆朋(1998-),男,新疆人,硕士研究生,研究方向为植物病理学,(E-mail)184879943@qq.com
基金资助:
新疆生产建设兵团财政科技计划项目-南疆重点产业创新发展支撑计划(2020DB006)

Anther bacterial diversity of Korla Fragrant Pear before and after flowering

WANG Qingpeng(), YAN Chengcai, WANG Zhe, GOU Changqing, WANG Lan, FENG Hongzu, HAO Haiting()

Key Laboratory of Integrated Pest Management (IPM) of Xinjiang Production and Construction Corps in Southern Xinjiang / Aral Crop Pest Science Observation and Experiment Station of the Ministry of Agriculture and Rural Affairs /College of Agronomy, Tarim University, Aral Xinjiang 843300, China

Received:2024-01-25 Published:2024-08-20 Online:2024-09-19
Correspondence author: HAO Haiting(1986-), female, from Shaanxi,Ph.D., associate professor, research direction:plant microbial interaction, (E-mail)Haohaiting213@taru.edu.cn
Supported by:
The Fiscal Science and Technology Program Project of Xinjiang Production and Construction Corps(2020DB006)

摘要/Abstract

摘要：

【目的】研究库尔勒香梨花药细菌的多样性,分析库尔勒香梨开花前后花药细菌变化,为新疆南疆梨树常见病害的防治提供菌种资源。【方法】采用平板涂布法分离和纯化香梨开花前后花药细菌,分析细菌多样性,并借助16S rDNA基因序列分析技术对其进行分子鉴定,确定其分类地位。【结果】香梨开花前后花药所携带的细菌种类具有多样性。对开花前后花药分离的菌株分别随机挑选9株和7株进行分子鉴定,筛选的9株开花前花药细菌全部归属于芽孢杆菌属,其中包括枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌。筛选的7株开花后花药细菌除了有芽孢杆菌属细菌,也包括鞘氨醇杆菌属细菌,开花后花药细菌多样性大于开花前。【结论】开花前花药所携带的细菌其中有5株为枯草芽孢杆菌,2株为解淀粉芽孢杆菌,2株为贝莱斯芽孢杆菌。开花后花药所携带的细菌其中有3株为枯草芽孢杆菌,2株为解淀粉芽孢杆菌,1株为副炭疽芽孢杆菌,1株为多食鞘氨醇杆菌。

关键词: 库尔勒香梨花药; 细菌; 多样性

Abstract:

【Objective】 The study investigated the bacterial presence in the anthers of Korla Fragrant pear blossoms, analyzing the changes in bacterial populations before and after flowering, to provide microbial resources for the prevention and control of common diseases in Fragrant pear trees in southern Xinjiang.【Methods】 The flat-plate coating method was employed to isolate and purify the bacteria from the anthers of Fragrant pear blossoms before and after flowering. The bacterial diversity was analyzed, and molecular identification was conducted using 16S rDNA gene sequencing to determine their taxonomic status.【Results】 The bacterial species carried by the anthers of korla Fragrant pear blossoms before and after flowering exhibited diversity. Nine strains were randomly selected for molecular identification from the bacteria isolated from the anthers before flowering, all of which were categorized under the Bacillus genus, including Bacillus subtilis, Bacillus amyloliquefaciens, and Bacillus velezensis. Additionally, seven strains were randomly selected from the bacteria isolated after flowering; these included not only Bacillus genus but also bacteria from the Sphingobium genus, indicating greater diversity in the bacteria after flowering compared to before.【Conclusion】 Among the bacteria carried by the anthers before flowering, five strains were identified as Bacillus subtilis, two as Bacillus amyloliquefaciens, and two as Bacillus velezensis. After flowering, the bacteria included three strains of Bacillus subtilis, two strains of Bacillus amyloliquefaciens, one strain of Bacillus paranthracis, and one strain of Sphingobacterium multivorum.

Key words: Korla Fragrant pear anther; Bacteria; Diversity

中图分类号:

S661.2

王庆朋, 闫成才, 王喆, 苟长青, 王兰, 冯宏祖, 郝海婷. 库尔勒香梨开花前后花药细菌多样性分析[J]. 新疆农业科学, 2024, 61(8): 1976-1982.

WANG Qingpeng, YAN Chengcai, WANG Zhe, GOU Changqing, WANG Lan, FENG Hongzu, HAO Haiting. Anther bacterial diversity of Korla Fragrant Pear before and after flowering[J]. Xinjiang Agricultural Sciences, 2024, 61(8): 1976-1982.

图/表 10

参考文献 18

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采样批次 Sampling batch	采样地点 Sampling site	采样时间 Sampling time (M/D)	采样经度纬度 Sampling latitude and longitude
Ⅰ	风雨操场旁采样	4/6	81°17'18″ E 40°32'30″ N
Ⅱ	工科楼旁采样	4/11	81°17'52″ E 40°32'30″ N
Ⅲ	校园外采样	4/11	81°17'52″ E 40°32'30″ N

采样批次 Sampling batch	采样地点 Sampling site	采样时间 Sampling time (M/D)	采样经度纬度 Sampling latitude and longitude
Ⅰ	风雨操场旁采样	4/6	81°17'18″ E 40°32'30″ N
Ⅱ	工科楼旁采样	4/11	81°17'52″ E 40°32'30″ N
Ⅲ	校园外采样	4/11	81°17'52″ E 40°32'30″ N

采样批次 Sampling batch	采样地点 Sampling site	采样时间 Sampling time (M/D)	采样经度纬度 Sampling latitude and longitude
①	工科楼旁采样	4/9	81°17'52″ E 40°32'30″ N
②	青少宫旁采样	4/13	81°17'19″ E 40°32'49″ N
③	校园外采样	4/18	81°15'42″ E 40°33'49″ N
④	工科楼旁采样	4/20	81°17'52″ E 40°32'30″ N
⑤	风雨操场旁采样	5/4	81°17'18″ E 40°32'30″ N

采样批次 Sampling batch	采样地点 Sampling site	采样时间 Sampling time (M/D)	采样经度纬度 Sampling latitude and longitude
①	工科楼旁采样	4/9	81°17'52″ E 40°32'30″ N
②	青少宫旁采样	4/13	81°17'19″ E 40°32'49″ N
③	校园外采样	4/18	81°15'42″ E 40°33'49″ N
④	工科楼旁采样	4/20	81°17'52″ E 40°32'30″ N
⑤	风雨操场旁采样	5/4	81°17'18″ E 40°32'30″ N

体系成分 System component	用量 Dosage (μL)
模板 Template	1
27F/1492R引物 Primer 27F/1492R (10 mol/μL)	0.5
Taq Master Mix	12.5
ddH₂O 10.5 μL	10.5

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Anther bacterial diversity of Korla Fragrant Pear before and after flowering

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样本批次 Sample batch	细菌的分离涂布 Isolation coating of bacteria	纯化菌株编号 Purified strain number
Ⅰ	A、B、C、D、E	1-23
Ⅱ	F、G、H、I	A-1-A-30
Ⅲ	J、K、L	B1-B6
①	M、N	X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7
②	O、P	X8、Z1
③	Q	X9、X10、X11
④	R、S、T、U、V	X12、X13、X14、X15、X16、 Z2、Z3、Z4、Z5

菌株编号 Strain number	引物 Primer	片段长度 Segment length (bp)	最相近菌种 Most closely related species	相似性 Similarity (%)	菌属 Bacteria
4	16S	1 439	解淀粉芽孢杆菌 B. amyloliquefaciens(km823957.1)	96.10	芽孢杆菌属(Bacillus)
8	16S	1 476	枯草芽孢杆菌 B. Subtilis (MF957285.1)	99.37	芽孢杆菌属(Bacillus)
12	16S	1 452	贝莱斯芽孢杆菌 B. Velezensis (MW926959.1)	98.91	芽孢杆菌属(Bacillus)
16	16S	1 455	枯草芽孢杆菌 B. subtilis (KM234223.1)	99.54	芽孢杆菌属(Bacillus)
22	16S	1 341	枯草芽孢杆菌 B. subtilis(MW714642.1)	99.29	芽孢杆菌属(Bacillus)
A-11	16S	1 455	枯草芽孢杆菌 B. subtilis (KM234223.1)	99.64	芽孢杆菌属(Bacillus)
A-18	16S	1 492	枯草芽孢杆菌 B. subtilis(MW812268.1)	98.67	芽孢杆菌属(Bacillus)
A-26	16S	1 291	解淀粉芽孢杆菌 B. amyloliquefaciens(AB813716.1)	98.79	芽孢杆菌属(Bacillus)
A-35	16S	1 453	贝莱斯芽孢杆菌 B. velezensis (MT383653.1)	99.44	芽孢杆菌属(Bacillus)
X2	16S	1 272	枯草芽孢杆菌 B. subtilis (DQ383271.1)	94.55	芽孢杆菌属(Bacillus)
X3	16S	1 483	枯草芽孢杆菌 B. subtilis (JQ900635.1)	96.84	芽孢杆菌属(Bacillus)
X6	16S	1 458	副炭疽芽孢杆菌 B. paranthracis(MT509411.1)	99.27	芽孢杆菌属(Bacillus)
X7	16S	1 451	解淀粉芽孢杆菌 B. amyloliquefaciens(KR063202.1)	99.28	芽孢杆菌属(Bacillus)
X13	16S	1 454	枯草芽孢杆菌 B. subtilis (MW345828.1)	99.72	芽孢杆菌属(Bacillus)
X16	16S	1 431	多食鞘氨醇杆菌 S. multivorum(KT614052.1)	99.15	鞘氨醇杆菌属(Sphingobium)
Z1	16S	1 455	解淀粉芽孢杆菌 amyloliquefaciens(KF836532.1)	97.77	芽孢杆菌属(Bacillus)

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