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Production of the Extremely Thermostable Xylanase by Recombinant Escherichia coli

  • Received:2004-06-25 Revised:2004-06-25 Online:2004-06-25 Published:2004-06-25

大肠杆菌重组菌生产极端耐热木聚糖酶的研究

娄恺;于安峰;邢新会   

  1. 清华大学化工系生物化工研究所,北京,100084;新疆农科院微生物研究所,新疆乌鲁木齐,830000;清华大学化工系生物化工研究所,北京,100084

摘要: 将含有来自于嗜热网球菌(Dictyoglomus thermophilum)Rt46B.1编码极端耐热木聚糖酶基因xynB的表达载体pET-DBc转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),获得重组菌E.coli DB1,目的基因可表达出有活性且耐90℃的木聚糖酶.E.coliDB1发酵培养基的较佳组成为(g/l):葡萄糖50,NH4Cl 3、MgSO4 0.5、CaCl2 0.6、Na2HPO4·7H2O 12.8、KH2PO4 3.0和NaCl 0.5.在工程菌培养的对数生长前期加入终浓度为1 mmol/l的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)进行诱导,对菌体生长无阻碍作用,木聚糖酶酶活在菌体生长的后期达到最高,利用优化的培养基在不加入IPTG的情况下木聚糖酶酶活仍维持在很高的水平.