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Optimization of Orthogonal Diagram of RAPD-PCR Reaction System in Amygdalus communis L.

SUN Jing-ke;LUO Shu-pin;LI Jiang;ZENG Bin   

  • Received:2007-05-25 Revised:2007-05-25 Online:2007-05-25 Published:2007-05-25

巴旦杏RAPD-PCR反应体系的正交优化

孙晋科;罗淑萍;李疆;曾斌   

  1. 新疆农业大学,生命科学系,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学,园艺学院,乌鲁木齐,830052

摘要: 以巴旦杏DNA为模板,利用L25(56)正交设计,研究了dNTPs、DNA模板、Mg2+、Taq酶和随机引物5种RAPD反应组分浓度变化对扩增结果的影响.量化的分析结果表明,正交试验的方法可以较为准确地反映各个因素在不同水平上对RAPD-PCR的影响.试验研究建立的巴旦杏RAPD-PCR最佳反应体系为:25 μL PCR反应体系中, 10×Taq Buffer 2.5 μL, 2.0 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,模板DNA为30 ng,随机引物0.8 μmol/L,Taq聚合酶1.5 U.