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The Development of TRAP-PCR Amplification System of Cotton

MIAO Pei-ming;LUO Shu-ping;FAN Lin   

  • Received:2008-06-25 Revised:2008-06-25 Online:2008-06-25 Published:2008-06-25

棉花TRAP-PCR扩增体系的建立

苗培明;罗淑萍;范玲   

  1. 新疆农科院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐,830091;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052;新疆农科院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐,830091

摘要: 为将新型分子标记-靶位区域扩增多态性(target region amplified polymorphism,TRAP)应用到遗传棉花多样性研究中,分析了不同浓度梯度的模板DNA、Mg2+ 、dNTPs、Taq酶与引物浓度对TRAP-PCR扩增结果的影响.确立了稳定性强、重复性好的棉花TRAP-PCR最佳反应体系:在15 μL的TRAP-PCR反应体系中,含10×buffer 1.5 μL,25 mM MgCl2 1.5 μL,2.5 mM dNTPs 2.0 μL,20 mM固定引物0.75 μL,20 mM随机引物0.15 μL,100 ng/μL DNA 0.5 μL,Tap酶0.2 μL.结果表明优化后的TRAP-PCR反应体系可应用于棉花遗传多样性分析研究中.