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Isolation and Identification of Bovine viral diarrhea Virus

NIU Guo-hui;JI Xin-cheng;DUAN Xiao-dong;CHAO Qun-fang   

  • Received:2010-05-25 Revised:2010-05-25 Online:2010-05-25 Published:2010-05-25

牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定

牛国辉;季新成;段晓东;晁群芳   

  1. 新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063;新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046

摘要: [目的]为了解牛病毒性腹泻/黏膜病在新疆的流行现状,对疑似该病病料进行地方毒株的分离,并对其进行鉴定.[方法]将采自新疆不同地区疑似牛病毒性腹泻的病料接种MDBK细胞,并盲传2~4代;对分离株进行毒力测定及中和试验,应用RT-PCR方法扩增分离株的5'UTR基因片段并克隆测序分析.[结果]分离到的8 株病毒可发生细胞病变,在MDBK细胞上的TCID50为103~106.毒株血清中和实验结果,RT-PCR反应结果,克隆后重组质粒经BamH I、Hind III双酶切鉴定、重组质粒PCR鉴定结果均得到预计扩增片段.重组质粒测序结果与GenBank中已发表的牛病毒性腹泻病毒NADL株序列同源性为82.0;~94.8;.[结论]证实所分离到的病毒为BVDV,命名为B-S-1、B-S-2、B-S-3、B-S-4、B-S-5、B-S-6、B-G-1和B-G-2.