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Construction and Transient Expression of Eukaryotic Expression Plasmid for N Protein Gene of Canine Distemper Virus (CDV)

JIAN Zi-jian;MA Su-zhen;SHEN Weihong;ZHAI Shao-hua;ZHAO Sen   

  • Received:2012-03-25 Revised:2012-03-25 Online:2012-03-25 Published:2012-03-25

犬瘟热病毒N蛋白基因真核表达质粒的构建与瞬时表达

简子健;马素贞;申卫红;翟少华;赵森   

  1. 新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052

摘要: [目的]构建犬细小病毒(CPV) VP2基因真核表达质粒,为研究核酸疫苗奠定基础.[方法]参考GenBank中发表的CDV N蛋白基因序列设计引物,采用RT - PCR方法从疑似犬瘟热病犬全血样品中扩增CDV N蛋白基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+).经测序验证后,小白鼠尾静脉注射瞬时表达CDV N蛋白基因,8h取其肝脏提取总RNA,进行RT - PCR方法扩增.[结果]在病犬的全血样品中扩增得到1 572 bp的CDV N蛋白基因片段,并构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)- CDV N,从瞬时表达的小白鼠肝脏总RNA中可扩增到目的条带.[结论]构建了犬瘟热病毒N蛋白基因真核表达质粒,并在小白鼠体内进行了瞬时表达.