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Xinjiang Agricultural Sciences

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Maize ZmCIPK42 Prokaryotic Expression Vector Construction and Its Protein Purification

CHEN Xun-ji;CHEN Guo;HUANG Quan-sheng   

  • Received:2013-01-25 Revised:2013-01-25 Online:2013-01-25 Published:2013-01-25

玉米ZmCIPK42原核表达载体构建及蛋白纯化

陈勋基;陈果;黄全生   

  1. 新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐,830091





摘要： [目的]分析玉米ZmCIPK42序列,诱导蛋白表达,并获得纯化的蛋白.[方法]利用蛋白分析软件分析ZmCIPK42性质及磷酸化作用位点,构建ZmCIPK2-pET30a原核表达载体,用IPTG诱导蛋白表达,用NiNTA树脂纯化蛋白.[结果]ZmCIPK42具有典型的CIPK家族基因的N端激酶结构域和C端NAF调控域,激酶结构域内有较多磷酸化位点,原核表达的ZmCIPK42主要以包涵体形式存在,用Ni-NTA树脂可以纯化获得有活性的ZmCIPK42蛋白.[结论]28℃诱导后ZmCIPK42可以有活性的蛋白.用His作为标签纯化ZmCIPK42蛋白,可高效获得大量纯化蛋白.