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Xinjiang Agricultural Sciences

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Optimization on PCR Amplification Procedure of the Malus sieversii S-gene

WANG Yun;QIN Wei;WANG Yong-feng   

  • Received:2013-11-25 Revised:2013-11-25 Online:2013-11-25 Published:2013-11-25

新疆野苹果S基因特异性PCR体系优化

王云;秦伟;王永丰   

  1. 新疆农业大学特色果树研究中心,乌鲁木齐,830052





摘要： [目的]构建适合新疆野苹果自交不亲和基因的PCR扩增程序的优化体系.[方法]采用单因素比较试验,对影响S-RNase基因PCR反应体系的6个主要因素进行梯度扩增.[结果]在20μL的PCR总反应体系中,Mg2+的最适浓度为2.5 mmol/L,dNTP的最适浓度为0.2 mmol/L,引物的最适浓度为0.5mmol/L,TaqDNA聚合酶的最适用量为0.75 U,模板DNA的最适用量为800 ng,最适退火温度为49℃.[结论]利用优化的扩增体系在99个新疆野苹果都获得了有效扩增,证明该体系为进行新疆野苹果S基因PCR扩增的最佳体系,具有良好的稳定性.