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Xinjiang Agricultural Sciences

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Cloning of Wheat SBE Ⅱ a and SS Ⅱ a Genes Partial Sequence and Construction of Their VIGS Recombinant Vectors

LI Miao-miao;NAN Fu-bo;LIU Wei;LI Wei-hua   

  • Received:2013-11-25 Revised:2013-11-25 Online:2013-11-25 Published:2013-11-25

小麦SBEⅡa、SSⅡa基因片段的克隆及VIGS重组载体的构建

李淼淼;南富波;刘伟;李卫华   

  1. 石河子大学农学院/新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,新疆石河子,832003





摘要： [目的]克隆小麦SBEⅡa、SSⅡa基因部分序列并构建二者的VIGS重组载体,为在小麦上利用VIGS技术研究SBEⅡa、SSⅡa基因与小麦淀粉合成的关系奠定基础.[方法]根据GenBank中公布的小麦SBEⅡa(AF286319.1)、SSⅡa(AF155217.2)基因序列分别设计特异引物,利用RT-PCR技术克隆SBEⅡa、SSⅡa基因的特异片段.然后以BSMV:γ-PDS为原载体,通过酶切连接用SBEⅡa、SSⅡa基因片段分别将原载体中的PDS基因进行替换,从而构建BSMV:γ-SBEⅡa和BSMV:γ-SSⅡa重组载体.[结果]克隆的SBEⅡa和SSⅡa基因片段长分别是178 bp和171 bp.序列分析表明:SBEⅡa基因片段与小麦SBEⅡa(AF286319.1)序列同源性为100;;、SSⅡa基因片段与SSⅡa(AF155217.2)序列同源性也为100;;酶切鉴定结果表明成功构建BSMV:γ-SBEⅡa和BSMV:γ-SSⅡa重组载体.[结论]构建的BSMV:γ-SBEⅡa和BSMV:γ-SSⅡa重组载体将为下一步利用VIGS技术在小麦上研究SBEⅡa、SSⅡa基因与小麦淀粉合成的关系奠定基础.