狂犬病病毒修饰基因组的构建

狂犬病病毒修饰基因组的构建

魏玉荣;易忠;符子华;马素贞;简子健;胡尔玛西;王海烽;魏婕;朱晶晶

新疆畜牧科学院兽医研究所,乌鲁木齐,830000;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052;新疆畜牧科学院兽医研究所,乌鲁木齐,830000;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052;塔里木大学,新疆阿拉尔,843300

收稿日期:2010-06-25 修回日期:2010-06-25 出版日期:2010-06-25 发布日期:2010-06-25

Construction of Genomes-Rabies Virus Modified

WEI Yu-rong;YI Zhong;FU Zi-hua;MA Su-zhen;JIAN Zi-jian;Huermaxi;WANG Hai-feng;WEI Jie;ZHU Jing-jing

Received:2010-06-25 Revised:2010-06-25 Published:2010-06-25 Online:2010-06-25

摘要/Abstract

摘要： [目的]利用反向遗传学技术在DNA水平上构建了狂犬病病毒修饰基因组.[方法]提取狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)口服疫苗株SRV9基因组总RNA作为RT-PCR的扩增模板,并根据GenBank已发表的SRV9基因组序列设计引物, 缺失狂犬病基因组Ψ区并在缺失位置插入人细胞色素C基因,再设计引物删除糖蛋白(G)胞质区(CD区).缺失Ψ区及删除CD区时采用基因同源重组的方法进行.在缺失的Ψ区插入人细胞色素C基因时,利用引物引入酶切位点NheI和EcoRI, 用PCR扩增出人细胞色素C基因并插入NheI和EcoRI位点.[结果]获得含预期的人细胞色素C基因,同时缺失了CD区与Ψ区的质粒pBSK- LA.[结论]全基因组测序结果表明已成功构建了狂犬病病毒修饰基因组.

魏玉荣;易忠;符子华;马素贞;简子健;胡尔玛西;王海烽;魏婕;朱晶晶. 狂犬病病毒修饰基因组的构建[J]. .

WEI Yu-rong;YI Zhong;FU Zi-hua;MA Su-zhen;JIAN Zi-jian;Huermaxi;WANG Hai-feng;WEI Jie;ZHU Jing-jing. Construction of Genomes-Rabies Virus Modified[J]. .