盐穗木HcGKR基因亚细胞定位表达载体的构建及定位分析

盐穗木HcGKR基因亚细胞定位表达载体的构建及定位分析

郝晓燕;张毓露;足木热木;危晓薇;邵琳;陈果;黄全生

新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐,830091;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052

收稿日期:2012-02-25 修回日期:2012-02-25 出版日期:2012-02-25 发布日期:2012-02-25

Construction of Expression Vector and Subcellular Localization Analysis of Guanylate Kinase -related Protein Gene in Halostachys caspica

HAO Xiao-yan;ZHANG Yu-lu;Zumuremu;WEI Xiao-wei;SHAO Lin;CHEN Guo;HUANG Quan-sheng

Received:2012-02-25 Revised:2012-02-25 Online:2012-02-25 Published:2012-02-25

摘要/Abstract

摘要： [目的]以GFP基因为报告基因,构建HcGKR基因的亚细胞定位表达载体.[方法]采用PCR方法和基因枪法.[结果]用PCR法,以pGEM- T- HcGKR质粒为模板,获得HcGKR基因的目的片段.然后将其克隆到亚细胞定位表达载体35S:GFP中,获得由CaMV35S启动子调控目的基因的35S - GFP - HcGKR融合表达载体,使目的基因能够和GFP融合同时表达.采用基因枪法将35S - GFP - HcGKR转化到洋葱表皮细胞中,暗培养24 h后,经共聚焦显微镜观察确定发出绿色荧光的位置,对HcGKR基因进行亚细胞定位.[结论]构建的亚细胞定位表达载体可在植物细胞中表达,通过洋葱细胞中绿色荧光的位置确定目的基因定位在细胞膜上,为进一步盐穗木HcGKR基因的功能奠定了理论基础.

郝晓燕;张毓露;足木热木;危晓薇;邵琳;陈果;黄全生. 盐穗木HcGKR基因亚细胞定位表达载体的构建及定位分析[J]. .

HAO Xiao-yan;ZHANG Yu-lu;Zumuremu;WEI Xiao-wei;SHAO Lin;CHEN Guo;HUANG Quan-sheng. Construction of Expression Vector and Subcellular Localization Analysis of Guanylate Kinase -related Protein Gene in Halostachys caspica[J]. .