羊粪沼液微生物总DNA提取方法优化比较研究

羊粪沼液微生物总DNA提取方法优化比较研究

陈竞;苏艳;冯蕾;杨新平;秦新政;古丽·艾合买提

新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052;新疆农业科学院微生物应用研究所,乌鲁木齐830091;新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052;新疆农业科学院微生物应用研究所,乌鲁木齐,830091

收稿日期:2013-12-25 修回日期:2013-12-25 出版日期:2013-12-25 发布日期:2013-12-25

The Optimization Extraction Methods of Total Microbial DNA of Sheep Dung Biogas Slurry

CHEN Jing;SU Yan;FENG Lei;YANG Xin-ping;QIN Xin-zheng;Guli Aihemaiti

Received:2013-12-25 Revised:2013-12-25 Online:2013-12-25 Published:2013-12-25

摘要/Abstract

摘要： [目的]目前沼液污泥中99;的微生物不可培养的,为开展羊粪沼液中微生物多样性的研究,须对沼液总DNA进行提取.[方法]研究以总DNA及其PCR产物的琼脂糖电泳结果为判定依据,以SDS结合酚氯仿抽提总DNA的方法为基础,采用逐步增加净化菌泥、溶菌酶裂解以及DNA纯化等优化方法,并测定优化效果.[结果]后续增加的步骤对提高总DNA的提取效率及质量十分有效,所得DNA在得率、大小以及纯净度方面都有所提高,可以满足后续分子实验的要求.[结论]以SDS法为基础,用TENP和PBS洗涤菌泥,添加适量溶菌酶,并适当延长反应时间至3h,再经纯化柱吸附和洗脱的方法可以获得更高质量的羊粪沼液总DNA.

陈竞;苏艳;冯蕾;杨新平;秦新政;古丽·艾合买提. 羊粪沼液微生物总DNA提取方法优化比较研究[J]. .

CHEN Jing;SU Yan;FENG Lei;YANG Xin-ping;QIN Xin-zheng;Guli Aihemaiti. The Optimization Extraction Methods of Total Microbial DNA of Sheep Dung Biogas Slurry[J]. .