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王雅琴;李艳军;张新宇;刘永昌;石淼;孙杰
WANG Ya-qing;LI Yan-jun;ZHANG Xin-yu;LIU Yong-chang;SHI Miao;SUN Jie
摘要: [目的]分离棉花中的阿拉伯半乳聚糖蛋白.[方法]以陆地棉18DPA棉纤维cDNA为模板,RT-PCR扩增获得GhFLA4基因全长cDNA序列.[结果]序列比对分析发现该cDNA包括阅读框732 bp,编码244个氨基酸,与二穗短柄草、葡萄、火炬松等序列的同源性分别为60;、59;、54;.qPCR结果表明,GhFLA4基因在根、茎、叶中均有表达,但在纤维细胞中优势表达.利用Gateway技术将GhFL44基因融合到含GFP的双元表达载体pGWB5中,转化农杆菌并注射烟草叶片,发现该基因定位于细胞核及细胞质内.原核表达产物经SDS-PAGE分析表明,诱导产物中含有一条与理论值相符的29 KDa融合蛋白.[结论]推测GhFLA4可能在棉花纤维伸长至次生壁合成的重叠期发挥着信号传导作用.