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Xinjiang Agricultural Sciences

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Development of Nested-PCR Diagnostic Method for Detection of Babesia bigemina

JIAN ZI-jian;MA Su-zhen;SUN Qi-zhe;SHEN Jiong-yu;MIAO Zhong-qiu;L(U) Wei   

  • Received:2010-04-25 Revised:2010-04-25 Online:2010-04-25 Published:2010-04-25

牛双芽巴贝斯虫巢式PCR诊断方法的建立

简子健;马素贞;孙其喆;沈炯玉;苗中秋;吕伟   

  1. 新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052





摘要： [目的与方法]根据Genbank上登陆的双芽巴贝斯虫HSP20基因设计两对引物, SHSP-P1与SHSP-P2和SHSP-P3与 SHSP-P4,以其建立牛双芽巴贝斯虫巢式PCR快速检测方法.[结果]第一次、第二次扩增的退火温度均为57℃,分别扩增出约631和409 bp的条带,与预期的大小相符,而作为对照样本的牛巴贝斯虫、牛环形泰勒虫基因组DNA均无此扩增目的条带出现.将感染双芽巴贝斯虫的全血基因组DNA做10倍递减稀释到106倍扩增时,巢式PCR还能见到目的条带,其灵敏度相当于4.6 pg/mL全血基因组DNA.在对50份疫区牛全血DNA样本检测中,阳性检出率分别为22; (11/50).[结论]所建立的牛双芽巴贝斯虫巢式PCR方法准确、敏感、特异,可以用于牛双芽巴贝斯虫病的快速检测和小范围的流行病学调查,具有重要的临床意义.