]*>","")" /> Establishment of Bovine Viral Diarrhea Virus Recombinant Protein ELISA Assay
Xinjiang Agricultural Sciences

• Article • Previous Articles     Next Articles

Establishment of Bovine Viral Diarrhea Virus Recombinant Protein ELISA Assay

ZHONG Fa-gang;HUANG Xin;WANG Xin-hua;LI Na   

  • Received:2010-04-25 Revised:2010-04-25 Online:2010-04-25 Published:2010-04-25

牛病毒腹泻病毒(BVDV)E2重组蛋白ELISA检测方法的初步建立

钟发刚;黄新;王新华;李娜   

  1. 新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆石河子,832000





摘要： [目的]为牛病毒性腹泻病毒抗体快速检测提供敏感、特异检测方法.[方法]重组质粒pET-(1-345)转化宿主菌BL21(DE),以IPTG进行诱导表达,使外源基因获得了较高水平的表达; Westem一blot检测表达产物反应原性,同时进行特异性检测;将收集的纯培养物进行超声波裂解后以His bind kit蛋白质纯化试剂盒纯化回收目的蛋白,再以纯化后的目的蛋白作为包被抗原进行方阵滴定试验,确定目的蛋白作为包被抗原的最佳稀释度.[结果]重组蛋白表达可达菌体蛋白总量的19.7;,且具有较好的反应原性和特异性,以此方法建立的间接ELISA方法对收集的约43头份血清样品进行检测, 检测阳性结果与进口试剂盒检测结果符合率达到93.55;.[结论]以BVDV E2重组蛋白作为抗原建立的间接ELISA检测方法是可行的,为其进一步的标准化莫定基础.