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The Design of the Primer and the Testing of Annealing Temperature of ASPV PRINS Detection

WU Qing-feng;NIU Jian-xin;LI Wen-hui;LIU Na   

  • Received:2011-11-25 Revised:2011-11-25 Online:2011-11-25 Published:2011-11-25

梨树苹果茎痘病毒PRINS检测中引物的设计及退火温度的测定

吴庆丰;牛建新;李文慧;刘娜   

  1. 石河子大学农学院,新疆石河子,832003

摘要: [目的]利用5条引物目的片段进行扩增,完成PRINS检测中引物及其退火温度的测定.[方法]采用确认带有ASPV的库尔勒香梨叶片,以叶片为试验材料,并采用经RT - PCR检测技术健康香梨的叶片作为阴性对照.引物采用NCBI提供的BLAST工具中的ASPV病毒的全基因组序列的外壳蛋白的保守区域进行设计.并根据PRINS特有的性质及ASPV病毒有片断相互重叠现象来设计相应的引物.[结果]这5条引物之间没有太多的干扰,且都在目的区域出现了比较清晰的条带.[结论]证明所设计引物可以在进一步的PRINS检测ASPV病毒时直接使用,为PRINS在梨树病毒检测方面发挥更大的作用奠定了基础.